(2S)-2-氨基-4-甲基-N-(4-硝基苯基)-戊酰胺单盐酸盐
[CAS# 16010-98-3]

基本信息

• 产品分类: 生物化工 >> 氨基酸及其衍生物 >> 亮氨酸类衍生物
• 产品名称: (2S)-2-氨基-4-甲基-N-(4-硝基苯基)-戊酰胺单盐酸盐
• 英文名: (2S)-2-Amino-4-methyl-N-(4-nitrophenyl)-pentanamide monohydrochloride
• 别名: L-Leucine-4-nitroanilide hydrochloride
• 分子式: C₁₂H₁₇N₃O₃.HCl
• 分子量: 287.74
• 蛋白质序列: L
• CAS 登录号: 16010-98-3
• 分子行输入简码SMILES: CC(C)C[C@@H](C(=O)NC1=CC=C(C=C1)[N+](=O)[O-])N.Cl

物理化学性质

• 熔点: 279-280 °C^*

^* Peschke, Wilhelm

安全数据

• 危险品标志: GHS07 警告
• 危害标签: H302-H315-H319-H335
• 防护标签: P261-P305+P351+P338

发现和应用

(2S)-2-氨基-4-甲基-N-(4-硝基苯基)戊酰胺单盐酸盐是一种手性氨基酰胺盐。其基本化合物源自亮氨酸：(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰胺骨架被苯胺基团修饰：酰胺的氮原子与4-硝基苯基取代基相连。单盐酸盐表示存在一当量HCl，形成稳定的盐，更易于操作且更易溶于极性溶剂。其分子式为C₁₂H₁₈ClN₃O₃（取决于盐的形式），分子量约为287 g/mol（以盐酸盐形式表示）。

该化合物在文献中被称为“L-亮氨酸对硝基苯胺盐酸盐”（或“L-Leu-pNA^.HCl”）。它是一种常用的生化试剂，尤其是在酶学领域。在酶动力学中，氨基酸的对硝基苯胺 (pNA) 衍生物是比色或荧光测定中常用的底物：当对硝基苯胺的酰胺键断裂时（例如被肽酶或蛋白酶水解），释放出的对硝基苯胺会产生显色信号，因为对硝基苯胺在可见光范围内（约 405 nm）具有强吸收。这一特性使得 (2S)-2-氨基-4-甲基-N-(4-硝基苯基)戊酰胺成为研究亮氨酸特异性蛋白酶、亮氨酸氨肽酶或其他对亮氨酸或小疏水性氨基酸残基具有特异性的酶的有用合成底物。

在合成方面，该化合物通常通过将 (2S)-2-氨基-4-甲基戊酰胺（即 L-亮氨酰胺）与 4-硝基苯胺偶联制备，或者通过在受控条件下使氨基酸的活化衍生物（例如酰氯或活性酯）与 4-硝基苯胺反应制备。酰胺键形成后，游离碱可通过氯化氢（气体或溶剂中的 HCl）处理转化为盐酸盐，并以单盐酸盐的形式结晶。亮氨酰胺骨架的手性 (2S) 构型得以保持，使分子具有旋光性；合成过程中需格外注意，以避免外消旋化，因为 C-2 位（α-碳）的立体中心在强偶联条件下非常敏感。

从功能上看，硝基苯基部分具有吸电子效应，既能活化酰胺基团以利于酶促裂解（使其更容易受到酶活性位点的亲核攻击），又能稳定离去基团（对硝基苯胺）。亮氨酸衍生的骨架赋予其疏水性，并模拟天然氨基酸底物。这使得该分子特别适用于定量亮氨酸肽酶活性或筛选亮氨酸裂解酶抑制剂的检测。由于其盐酸盐形式，该化合物在水和缓冲体系中具有更高的溶解度，从而提高了其在生化实验中的应用价值。

历史上，氨基酸的对硝基苯胺衍生物（如L-亮氨酸-对硝基苯胺）在20世纪中后期广泛应用于酶学领域。它们为测定酶动力学、抑制作用和酶特异性提供了便捷可靠的合成底物。与肽底物相比，对硝基苯胺衍生物合成更简便、稳定性更高，且更经济高效，适用于常规检测。随着时间的推移，其用途已从体外生化表征扩展到潜在酶抑制剂（尤其是蛋白酶和肽酶抑制剂）的高通量筛选。

安全性和操作：与许多对硝基苯胺衍生物一样，该化合物应小心操作，尤其是在处理其游离碱时。盐酸盐形式可降低挥发性并改善操作，但仍需遵守标准的实验室预防措施：戴手套、避免吸入并储存在阴凉干燥处。在缓冲溶液和检测中，应测试其溶解度和稳定性，因为 pH 值或离子强度的变化可能会影响其行为。

在研究和工业领域，(2S)-2-氨基-4-甲基-N-(4-硝基苯基)戊酰胺单盐酸盐仍然是一种重要的工具化合物。其结构明确、具有手性中心且作为酶底物的特性使其成为酶学研究的中坚力量，尤其是在亮氨酸氨肽酶样活性或抑制剂的研究中。通过监测对硝基苯胺的吸光度来检测裂解反应，简化了检测方法的设计，并支持基础生化研究和药物筛选。

参考文献



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