二乙酸荧光素
[CAS# 596-09-8]

基本信息

• 产品分类: 分析化学 >> 标准品 >> 药典标准品和杂志标准品
• 产品名称: 二乙酸荧光素
• 英文名: Fluorescein diacetate
• 别名: 3-Oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthene]-3',6'-diyl diacetate
• 分子式: C₂₄H₁₆O₇
• 分子量: 416.38
• CAS 登录号: 596-09-8
• EC 号码: 209-877-6
• 分子行输入简码SMILES: CC(=O)OC1=CC2=C(C=C1)C3(C4=C(O2)C=C(C=C4)OC(=O)C)C5=CC=CC=C5C(=O)O3

物理化学性质

• 密度: 1.5±0.1 g/cm³ 计算值^*
• 熔点: 200 - 203 °C (实验值)
• 沸点: 604.7±55.0 °C 760 mmHg (计算值)^*
• 闪点: 264.0±31.5 °C (计算值)^*
• 溶解度: DMSO:48mg/mL (实验值)
• 折射率: 1.681 (计算值)^*

^* 使用计算机软件 Advanced Chemistry Development (ACD/Labs) Software.

安全数据

• 危险品标志: GHS07 警告
• 危害标签: H302-H315-H319-H335
• 防护标签: P261-P305+P351+P338

发现和应用

二乙酸荧光素是荧光素的乙酰化衍生物，分子式为 C₂₄H₁₆O₈。其结构由一个荧光素核心组成，其中 3' 和 6' 位的两个羟基被转化为乙酸酯。这种修饰使该分子与母体荧光素相比不具有荧光性且疏水性更强，从而增强了其穿透细胞膜的能力。二乙酸荧光素通常呈淡黄色固体，可溶于丙酮、乙醇和二甲基亚砜等有机溶剂，但在水中的溶解度有限，除非发生水解。

该化合物被广泛用作细胞生物学和酶学中的荧光探针。一旦进入活细胞，细胞内酯酶会水解乙酸酯基团，重新生成荧光素，荧光素在适当的激发光下会发出强烈的荧光。这一特性使其可用于测定细胞活力、酯酶活性和膜完整性。代谢活跃的细胞会将二乙酸荧光素转化为具有荧光性的荧光素，而死亡或受损的细胞则保持无荧光状态。

二乙酸荧光素也应用于流式细胞术、荧光显微镜和高通量筛选检测，用于定量活细胞群体、监测酶活性或追踪细胞内过程。其疏水性的二乙酸酯形式使其能够有效地被细胞吸收，而酶促裂解产生的可溶于水且带电荷的荧光产物则保留在细胞内。

在合成方面，二乙酸荧光素是通过在碱性或催化条件下使用乙酸酐或乙酰氯对荧光素进行乙酰化制备的。该反应选择性地将羟基转化为乙酸酯，同时保留了水解后负责荧光的?愣趾诵慕峁埂Ｊ褂米⒁馐孪畎ū苊饨哟デ克峄蚯考睿悦怩セ缢猓约白裱砉饷粲饣衔锏谋曜疾僮鞴娣丁?$nl$$
总而言之，二乙酸荧光素是一种用于生物学和生物化学研究的重要荧光化合物。其细胞可渗透的二乙酸酯形式和酶促生成的荧光产物使其成为评估细胞活力、酯酶活性和其他细胞内过程的常用工具，可在体外和活细胞研究中提供可靠且灵敏的检测。

参考文献

2007. Single Cell Level Microalgal Ecotoxicity Assessment by Confocal Microscopy and Digital Image Analysis. Environmental Science & Technology, 41(9).
DOI: 10.1021/es0627390

2010. Development and Validation of a Quantitative, High-Throughput, Fluorescent-Based Bioassay to Detect Schistosoma Viability. PLoS Neglected Tropical Diseases, 4(7).
DOI: 10.1371/journal.pntd.0000759