5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷
[CAS# 7240-90-6]

基本信息

• 产品分类: 医药中间体 >> 杂环化合物中间体 >> 吡喃类化合物
• 英文名: 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside
• 别名: X-Gal
• 产品名称: 5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷; 5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷
• 分子式: C₁₄H₁₅BrClNO₆
• 分子量: 408.63
• CAS 登录号: 7240-90-6
• EC 号码: 230-640-8
• 分子行输入简码SMILES: C1=CC(=C(C2=C1NC=C2O[C@H]3[C@@H]([C@H]([C@H]([C@H](O3)CO)O)O)O)Cl)Br

物理化学性质

• 密度: 1.9±0.1 g/cm³ 计算值^*
• 熔点: 236 ºc (分解) (实验值)
• 沸点: 673.9±55.0 ºc 760 mmHg (计算值)^*
• 闪点: 361.3±31.5 ºc (计算值)^*
• 溶解度: dmso: 39ng/mL (实验值)
• 折射率: 1.732 (计算值)^*
• 比旋光度: -64 º (c=1, h2o/dmf (1/1))

^* 使用计算软件 Advanced Chemistry Development (ACD/Labs).

安全数据

• 危险品标志: GHS07 Warning
• 危害标签: H302-H312-H332
• 防护标签: P261-P264-P270-P271-P280-P301+P317-P302+P352-P304+P340-P317-P321-P330-P362+P364-P501

危害分类

危害	分类	类别码	危害标签
急性毒性	Acute Tox.	4	H332
急性毒性	Acute Tox.	4	H312
急性毒性	Acute Tox.	4	H302

发现和应用

5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷是一种合成的显色底物，广泛应用于分子生物学和生物化学，用于检测β-半乳糖苷酶的活性。该化合物由取代的吲哚部分与β-D-半乳糖连接而成。吲哚环上5位和4位分别被溴和氯原子取代，赋予了该分子独特的比色性质。

该底物的发现源于对β-半乳糖苷酶（一种常用作基因表达研究报告基因的酶）灵敏且特异的检测方法的需求。该化合物的开发旨在改进早期的底物，使其在酶促裂解时呈现更清晰、更强烈的颜色变化。

在酶促分析中，5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷是一种非荧光分子，当被β-半乳糖苷酶水解时，会释放出一种名为5-溴-4-氯-3-吲哚氧基的发色团。该中间体发生氧化和二聚化，形成不溶性蓝色沉淀。这种有色产物的形成使得人们能够直接在琼脂平板、膜或溶液中观察β-半乳糖苷酶的活性。

该底物广泛用于分子克隆和微生物学的蓝白斑筛选，通过颜色区分表达lacZ基因的重组菌落和非重组菌落。蓝色表示功能性β-半乳糖苷酶表达，且目标DNA序列已成功插入含有lacZ报告基因的载体中。

除蓝白斑筛选外，5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷还可用于组织化学染色，以定位组织或细胞中的β-半乳糖苷酶活性。这有助于研究基因表达模式、细胞分化和发育生物学。

该化合物的化学稳定性和显色性（卤素取代增强）使其成为灵敏、直接检测β-半乳糖苷酶活性的首选。其不溶性蓝色产物在测定条件下稳定，易于显影，无需额外试剂或复杂设备。

总而言之，5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷是一种卤化显色底物，用于检测β-半乳糖苷酶活性。它在分子生物学中广泛用于蓝白斑筛选和组织化学应用，能够可靠且直观地指示酶的存在和活性。

参考文献

1994. Analysis of β-glucans and chitin in a Saccharomyces cerevisiae cell wall mutant using high-performance liquid chromatography. Yeast, 10(8).
DOI: 10.1002/yea.320100810

2000. A hyperthermostable bacterial histone-like protein as an efficient mediator for transfection of eukaryotic cells. Nature Biotechnology, 18(11).
DOI: 10.1038/81221

2024. Efficient transformation and genome editing in a nondomesticated, biocontrol strain, Bacillus subtilis GLB191. Phytopathology Research, 6(1).
DOI: 10.1186/s42483-024-00287-0