5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯二钠盐
[CAS# 102185-33-1]

基本信息

• 产品分类: 有机原料 >> 杂环化合物 >> 吲哚化合物
• 产品名称: 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯二钠盐
• 英文名: 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate disodium salt
• 别名: disodium (5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl) phosphate
• 分子式: C₈H₄BrClNO₄P.₂Na
• 分子量: 370.43
• CAS 登录号: 102185-33-1
• EC 号码: 600-286-2
• 分子行输入简码SMILES: C1=CC(=C(C2=C1NC=C2OP(=O)([O-])[O-])Cl)Br.[Na+].[Na+]

物理化学性质

• 熔点: 300 °C (实验值)
• 溶解度: H2O中 20 mg/mL (实验值)

安全数据

• 危险品标志: GHS07 警告
• 危害标签: H319-H315-H335
• 防护标签: P261-P271-P280

发现和应用

5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐是一种合成的显色底物，广泛应用于分子生物学和生物化学，用于检测酶活性，尤其是碱性磷酸酶的活性。该化合物的结构来源于吲哚，其5位和4位分别被溴和氯原子取代，并在3位具有磷酸酯部分，形成二钠盐以增强其水溶性。

该化合物的开发旨在为免疫分析和印迹技术创造灵敏且稳定的底物。其用途源于其在酶促裂解后能够产生有色沉淀的能力。在碱性磷酸酶存在下，5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐 (BCIP) 发生去磷酸化，形成吲哚基中间体，该中间体自发地发生二聚化并在原位氧化，生成蓝紫色沉淀。这种可见的产品可以直接在膜上或组织样本中定性和半定量检测磷酸酶活性。

BCIP 常与硝基四唑蓝 (NBT) 联用在比色检测系统中。当两种底物一起使用时，碱性磷酸酶催化 BCIP 的转化，氧化的吲哚基中间体将 NBT 还原为不溶的深蓝色甲臜产物。该系统提供高灵敏度、持久的信号，在环境光和储存条件下保持稳定。它在蛋白质印迹、原位杂交、免疫组织化学和酶联免疫吸附试验 (ELISA) 等应用中尤其有用，可以可视化抗体或探针的结合。

在分子生物学研究中，BCIP/NBT 常用于检测硝酸纤维素膜或尼龙膜上与核酸结合的探针。该技术有助于分析基因表达模式以及特定 DNA 或 RNA 序列的存在。产生的蓝色表明杂交或抗原检测成功，其强度与目标分子的含量相关。

在组织学研究中，BCIP 也用于定位组织样本中的磷酸酶活性。形成的不溶性产物固定在酶活性位点，从而可以通过显微镜观察细胞和组织特异性的表达模式。这在发育生物学、病理学和细胞分化研究中非常有价值。

该底物通常以二钠盐的形式提供，以提高其在水性缓冲液中的溶解度并确保与生物样品的相容性。它在标准储存条件下通常稳定，可以将其配制成水或二甲基甲酰胺的原液以供实验使用。

尽管 BCIP 在非放射性标记系统中非常有效，但由于其可能具有刺激性，因此在处理 BCIP 时必须采取预防措施。实验室安全指南建议使用手套和防护眼镜，并应在通风良好的区域处理溶液。由于会产生卤代芳香族副产物，废物处理应符合当地环境法规的要求。

5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐的开发和应用代表了生物分析化学领域的重大进步，为研究人员提供了一种可靠、灵敏且直观易懂的方法来检测和量化各种生物和诊断系统中的酶活性和分子相互作用。

参考文献

1998. A mitogen‐activated protein (MAP) kinase homologue of Leishmania mexicana is essential for parasite survival in the infected host. The EMBO Journal, 17(9).
DOI: 10.1093/emboj/17.9.2619

2014. Discovery of novel enzymes with industrial potential from a cold and alkaline environment by a combination of functional metagenomics and culturing. Microbial Cell Factories, 13(72).
DOI: 10.1186/1475-2859-13-72

2024. Paper Analytical Device for the Colourimetric Detection of Alkaline Phosphatase in Serum and Saliva. Journal of Analysis and Testing, 8(3).
DOI: 10.1007/s41664-024-00304-3